近幾十年來(lái)的研究創(chuàng)新為 mRNA 作為新興疫苗技術(shù)的發(fā)展奠定了基礎(chǔ)。與傳統(tǒng)疫苗平臺(tái)相比，基于 mRNA 的疫苗開發(fā)相對(duì)于其它類型疫苗的加速得益于其簡(jiǎn)單的生產(chǎn)過(guò)程和安全性。首先，mRNA 不構(gòu)成插入誘變的風(fēng)險(xiǎn)。它是非感染性的，并在細(xì)胞內(nèi)自然降解。其次，可以通過(guò)修飾和各種遞送方法使 mRNA 更加穩(wěn)定，使其在宿主細(xì)胞中高效且易于翻譯。此外，可以使用體外轉(zhuǎn)錄 (IVT) 反應(yīng)在無(wú)細(xì)胞系統(tǒng)中制備 mRNA，與傳統(tǒng)的基于細(xì)胞的疫苗平臺(tái)相比，該技術(shù)更易于生產(chǎn)和調(diào)節(jié)。最后，mRNA 生產(chǎn)可以應(yīng)用于使用類似生物過(guò)程的各種抗原，使該技術(shù)易于適應(yīng)和更加通用。
最近的 COVID-19 大流行凸顯了擁有隨時(shí)可用的疫苗平臺(tái)以應(yīng)對(duì)新興流行病的重要性。為了應(yīng)對(duì)大流行，mRNA 技術(shù)是第一個(gè)作為 COVID-19 治療藥物進(jìn)入I期臨床試驗(yàn)的候選疫苗，疫苗的臨床試驗(yàn)在序列鑒定后兩個(gè)月開始。因此，mRNA 技術(shù)被帶到了疫苗療法研究和開發(fā)的前沿。強(qiáng)調(diào)使用 mRNA 疫苗治療當(dāng)前和新出現(xiàn)的疾病的前瞻性研究已經(jīng)推動(dòng)許多候選疫苗進(jìn)入各種傳染病的臨床試驗(yàn)。因此，由于新型 mRNA 疫苗技術(shù)帶來(lái)的好處和靈活性，人們?cè)絹?lái)越有興趣在未來(lái)幾年推進(jìn)其工業(yè)規(guī)模生產(chǎn)。這將涉及增強(qiáng)和優(yōu)化 mRNA 生物工藝，以適應(yīng)各種抗原平臺(tái)。
本綜述將概述 mRNA 疫苗的設(shè)計(jì)和 mRNA 疫苗平臺(tái)的當(dāng)前技術(shù)發(fā)展。此外，文章將側(cè)重于疫苗設(shè)計(jì)、生產(chǎn)和當(dāng)前實(shí)施的關(guān)鍵質(zhì)量屬性范例，以實(shí)現(xiàn)高規(guī)格 mRNA 疫苗生產(chǎn)的創(chuàng)新。最后，將討論 PAT 集成的生物制藥生產(chǎn)的未來(lái)方向和發(fā)展。
作為疫苗的 mRNA 的進(jìn)化
1989 年，一項(xiàng)開創(chuàng)性的研究證明了使用脂質(zhì)體進(jìn)行 RNA 轉(zhuǎn)染可生產(chǎn)蛋白質(zhì)。不久之后，另一項(xiàng)研究表明，將裸露的 mRNA 注入小鼠肌肉細(xì)胞會(huì)導(dǎo)致編碼蛋白在體內(nèi)表達(dá)。這些研究確立了使用體外轉(zhuǎn)錄的 mRNA 在細(xì)胞內(nèi)生產(chǎn)蛋白質(zhì)的可行性。然而，盡管有這些有希望的發(fā)現(xiàn)，但由于對(duì) mRNA 穩(wěn)定性和翻譯效率的擔(dān)憂，使用 RNA 作為治療工具面臨著幾個(gè)重大挑戰(zhàn)。因此，它并沒(méi)有立即被認(rèn)為是一種可行的治療選擇。
直到 2000 年代初，修飾核苷酸的技術(shù)突破和遞送方法的進(jìn)步才為 mRNA 作為潛在治療藥物鋪平了道路。許多創(chuàng)新，例如使用修飾的核苷酸、特定密碼子序列以及使用高效液相色譜 (HPLC) 消除雙鏈 RNA 污染物，有助于提高 mRNA 的穩(wěn)定性，并減輕不需要的免疫原性反應(yīng)，從而推動(dòng)了 mRNA 疫苗的開發(fā)。此外，細(xì)胞質(zhì) mRNA 遞送的效率也因各種遞送方法而發(fā)生了革命性變化，包括使用脂質(zhì)納米顆粒 (LNP)。
mRNA抗原的類型
通過(guò)體外轉(zhuǎn)錄 (IVT) 產(chǎn)生的 mRNA 抗原的結(jié)構(gòu)與成熟的真核 mRNA 非常相似。它們包含一個(gè)編碼目標(biāo)抗原的開放閱讀框 (ORF)，兩側(cè)是 5' 和 3' 非翻譯區(qū) (UTR) 和一個(gè) 5' 引物帽結(jié)構(gòu)，以及一個(gè) 3' poly(A) 尾部。目前，已經(jīng)評(píng)估了兩種類型的 mRNA 抗原構(gòu)建體：非復(fù)制和自我擴(kuò)增的 mRNA 抗原。兩者的結(jié)構(gòu)相似，除了自我復(fù)制型 mRNA 還包括通常來(lái)自單鏈 RNA 病毒的病毒復(fù)制酶基因（圖 1）。非復(fù)制性 mRNA 抗原由于其 RNA 長(zhǎng)度較短和直接抗原表達(dá)而更容易生產(chǎn)。然而，由于其表達(dá)時(shí)間較短，它可能需要更高的劑量才能產(chǎn)生適當(dāng)?shù)拿庖叻磻?yīng)。自擴(kuò)增 mRNA 抗原可以緩解這個(gè)問(wèn)題，因?yàn)樗鼣y帶病毒復(fù)制酶基因，以增強(qiáng) mRNA 表達(dá)持續(xù)時(shí)間。然而，由于較長(zhǎng)的 RNA 轉(zhuǎn)錄本長(zhǎng)度和自我擴(kuò)增的潛在免疫反應(yīng)，目前在生產(chǎn)和優(yōu)化此類抗原方面仍存在挑戰(zhàn)。研究人員目前正在探索優(yōu)化 mRNA 抗原表達(dá)和穩(wěn)定性的策略。
圖1：使用非復(fù)制mRNA和自擴(kuò)增mRNA表達(dá)抗原的簡(jiǎn)化示意圖。同樣，非復(fù)制和自我擴(kuò)增的RNA都可以用脂質(zhì)納米顆粒 (LNP) 包裹，以促進(jìn)細(xì)胞攝取，并防止mRNA降解。非復(fù)制的mRNA結(jié)構(gòu)體在細(xì)胞質(zhì)中被翻譯，以產(chǎn)生目的蛋白質(zhì)，此外，自擴(kuò)增的mRNA也被翻譯，以產(chǎn)生復(fù)制酶機(jī)制，用于擴(kuò)增目標(biāo)蛋白質(zhì)。所得抗原蛋白以跨膜或細(xì)胞內(nèi)蛋白的形式產(chǎn)生，用于刺激免疫反應(yīng)。
優(yōu)化 mRNA 抗原效率
設(shè)計(jì)有效的 mRNA 候選疫苗需要仔細(xì)考慮許多工藝屬性。最近的進(jìn)展創(chuàng)造了改造 mRNA 技術(shù)以創(chuàng)造更適合的 mRNA 疫苗抗原的機(jī)會(huì)。對(duì)于 mRNA 疫苗，有兩個(gè)主要成分：mRNA（抗原）（圖 2）和脂質(zhì)納米顆粒（遞送系統(tǒng)）。這兩個(gè)組成部分都需要進(jìn)行監(jiān)管，以確保高質(zhì)量的疫苗生產(chǎn)。
圖2：mRNA抗原設(shè)計(jì)的關(guān)鍵質(zhì)量屬性。影響轉(zhuǎn)錄質(zhì)量、效率和穩(wěn)定性的mRNA抗原屬性包括[1]5' 帽、[2]非翻譯區(qū)、[3]編碼序列、[4]3' Poly(A) 尾、[5]mRNA純度。
mRNA 5'帽：該帽是mRNA抗原的重要組成部分，在調(diào)節(jié)翻譯起始和免疫原性中起重要作用。有兩種常見的帽狀結(jié)構(gòu)：cap O，由甲基-7鳥嘌呤核苷酸通過(guò)5'三磷酸連接到5' 位置；cap 1，涉及核糖2'-O位置的mRNA首核苷酸甲基化。這些帽通過(guò)防止外切酶降解來(lái)穩(wěn)定mRNA轉(zhuǎn)錄物，并提供有效的翻譯起始位點(diǎn)來(lái)招募核糖體。此外，加帽mRNA有助于防止先天免疫反應(yīng)的過(guò)度激活。有幾種方法可以將5'帽添加到mRNA轉(zhuǎn)錄物上。一種方法是在IVT反應(yīng)中使用合成的帽類似物，而另一種方法涉及使用CleanCap?方法將cap 1結(jié)構(gòu)添加到特定的轉(zhuǎn)錄起始序列。加帽也可以使用牛痘加帽系統(tǒng)作為酶促反應(yīng)來(lái)完成。這些方法確保了對(duì)mRNA抗原的有效和精確的5'加帽，這對(duì)于開發(fā)有效的疫苗至關(guān)重要。
mRNA 5'和3'非翻譯區(qū)(UTR's)：5'和3'非翻譯區(qū)分別對(duì)翻譯效率和mRNA穩(wěn)定性至關(guān)重要。優(yōu)化的序列特異性富集UTR可以通過(guò)影響翻譯機(jī)器識(shí)別、招募和mRNA運(yùn)輸來(lái)促進(jìn)蛋白質(zhì)產(chǎn)量。優(yōu)化可以通過(guò)調(diào)整3'和5' UTR的長(zhǎng)度來(lái)實(shí)現(xiàn)，或者使用特定的核苷酸富集 (例如，5' UTR Kozak序列用于翻譯效率，3' UTR au豐富元件用于調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄物穩(wěn)定性)。選擇基于其它天然穩(wěn)定表達(dá)較長(zhǎng)的mRNA分子的UTR也有助于提高mRNA的翻譯效率和轉(zhuǎn)錄物的穩(wěn)定性。
抗原編碼序列：為了豐富抗原表達(dá)，目前使用密碼子優(yōu)化和組成來(lái)提高轉(zhuǎn)錄效率(如GC含量)。此外，修飾的核苷酸，包括甲基化核苷和假尿嘧啶，可以幫助保護(hù)mRNA免受強(qiáng)烈的免疫刺激反應(yīng)，增加mRNA的穩(wěn)定性，允許更長(zhǎng)的轉(zhuǎn)錄物表達(dá)，并提高疫苗的安全性。
mRNA 3' Poly(A) 尾：3' Poly(A) 尾通過(guò)保護(hù)序列免受核酸酶降解和為Poly(A) 結(jié)合蛋白結(jié)合提供位點(diǎn)，對(duì)mRNA的穩(wěn)定性很重要。Poly(A) 尾的最佳長(zhǎng)度取決于細(xì)胞類型，必須仔細(xì)優(yōu)化以提供最大的穩(wěn)定性。研究表明，poly(A) 尾的長(zhǎng)度與mRNA表達(dá)的持續(xù)時(shí)間之間存在相關(guān)性。添加poly(A) 尾的主要方法有兩種。第一種方法是將poly(A) 編碼序列直接添加到用于IVT的DNA模板中。第二種是使用單獨(dú)的酶促反應(yīng)，利用聚A聚合酶。poly (A) 尾的優(yōu)化對(duì)于確保mRNA轉(zhuǎn)錄物保持完整和功能至關(guān)重要，從而提供安全有效的候選疫苗。
mRNA純度：mRNA純度是一項(xiàng)關(guān)鍵的質(zhì)量屬性，必須仔細(xì)控制，以確保疫苗效力和最佳免疫反應(yīng)。RNA污染物激活觸發(fā)mRNA降解和抑制翻譯的免疫反應(yīng)。dsRNA污染物是IVT期間異常聚合酶活性產(chǎn)生的雜質(zhì)的一種形式。為了減輕這種情況的發(fā)生，使用HPLC純化IVT mRNA有助于去除dsRNA，增加蛋白質(zhì)產(chǎn)量，同時(shí)減少不必要的免疫激活。
脂質(zhì)納米顆粒 (LNP) 遞送mRNA疫苗的優(yōu)化：為了確保mRNA疫苗的有效性，需要將抗原正確遞送到細(xì)胞中，以表達(dá)目的蛋白質(zhì)。雖然裸mRNA可以在不同的細(xì)胞類型中整合和表達(dá)，但最佳表達(dá)需要一種遞送機(jī)制。這不僅有助于正確地遞送mRNA，以產(chǎn)生抗原，而且還保護(hù)其免受核酸酶的降解。在各種遞送系統(tǒng)中，目前LNP已廣泛用于疫苗開發(fā)，包括COVID-19 mRNA疫苗。大多數(shù)LNP配方含有陽(yáng)離子或電離脂質(zhì)以及磷脂、膽固醇和聚乙二醇(PEG)脂質(zhì)。每種類型的脂質(zhì)在調(diào)節(jié)細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)中mRNA抗原顆粒的穩(wěn)定性、有效性和生物分布方面發(fā)揮著不同的作用，可電離脂質(zhì)有助于內(nèi)體從中性pH值轉(zhuǎn)換為酸性pH值，這對(duì)于細(xì)胞攝取后mRNA的釋放很重要。其它脂質(zhì)，包括磷脂，如1,2-二硬脂酰-sn-甘油-3磷脂膽堿 (DSC)和DOPE，有助于穩(wěn)定LNP結(jié)構(gòu)，并有助于脂質(zhì)納米顆粒的內(nèi)體釋放。此外，膽固醇促進(jìn)LNP結(jié)構(gòu)的完整性，從而促進(jìn)細(xì)胞有效攝取。最后，聚乙二醇化脂質(zhì)通過(guò)延長(zhǎng)納米顆粒在血液中的循環(huán)，以促進(jìn)細(xì)胞攝取和減少聚集，從而增強(qiáng)LNP的穩(wěn)定性。因此，mRNA和LNP遞送系統(tǒng)的屬性和成分在mRNA疫苗產(chǎn)品的生產(chǎn)過(guò)程中是調(diào)節(jié)和控制抗原產(chǎn)量和質(zhì)量的關(guān)鍵考慮因素。
mRNA生產(chǎn)的演變和未來(lái)展望
mRNA疫苗生產(chǎn)概述
目前的mRNA生產(chǎn)過(guò)程可分為三個(gè)不同的階段：1- mRNA活性物質(zhì)的生產(chǎn)，2- RNA-LNP的配制，3-終產(chǎn)品的生產(chǎn)。
圖3：mRNA疫苗生產(chǎn)的主要工藝階段概述：1-mRNA活性物質(zhì)的生產(chǎn)，2-RNA-脂質(zhì)納米顆粒的制劑，3-終產(chǎn)品的生產(chǎn)。
階段 1： mRNA 活性物質(zhì)的產(chǎn)生
上游 mRNA 平臺(tái)過(guò)程通常涉及使用大腸桿菌發(fā)酵從質(zhì)粒中產(chǎn)生 DNA 模板。使用限制性內(nèi)切酶將質(zhì)粒線性化并用于 IVT 反應(yīng)，其中包含 NTP、緩沖液、MgCl2 以及 T7、SP6 或 T3 RNA 聚合酶，以在體外轉(zhuǎn)錄 mRNA。轉(zhuǎn)錄后修飾，包括 5' 加帽和 3' Poly (A) 尾添加，通常在 mRNA 合成后進(jìn)行。使用 DNase 消化任何剩余的 DNA 模板。當(dāng)前使用 CleanCap? 或帽類似物的加帽技術(shù)創(chuàng)新可以簡(jiǎn)化反應(yīng)過(guò)程，并在 IVT 反應(yīng)期間完成 5' 加帽，同時(shí)添加由模板 DNA 編碼的 Poly(A) 尾。
IVT 反應(yīng)后，必須從反應(yīng)混合物中純化 mRNA，因?yàn)樵S多雜質(zhì)包括酶、殘留的 NTP、殘留的 DNA 和來(lái)自提前中止反應(yīng)的短 RNA，而雙鏈 RNA (dsRNA) 會(huì)刺激不需要的免疫反應(yīng)并降低產(chǎn)品安全性。雖然目前還沒(méi)有基于法規(guī)要求的標(biāo)準(zhǔn)化純化方法，但目前各種mRNA抗原平臺(tái)采用多種純化和過(guò)濾方法。純化技術(shù)，例如尺寸排阻層析 (SEC)、離子對(duì)反相層析 (IPC)、離子交換層析 (IEC)、脫氧胸苷 (dT) – Oligo dT 親和層析、羥基磷灰石或疏水相互作用、多模式或基于纖維素的層析法。此外，切向流過(guò)濾 (TFF) 也可用于去除雜質(zhì)，同時(shí)進(jìn)行濃縮和溶液洗濾，使其成為大規(guī)模生產(chǎn)的通用過(guò)濾方法。 TFF 通常與 mRNA 沉淀結(jié)合使用，這樣可以保留 mRNA，同時(shí)通過(guò)洗濾去除雜質(zhì)。常見的 IVT 純化方案通常結(jié)合使用 TFF，然后是層析步驟和第二個(gè) TFF，以正確純化 mRNA，去除工藝污染物，并促進(jìn)濃縮和緩沖液置換。
階段 2 和 3： RNA-LNP 的配制和終產(chǎn)品生產(chǎn)
mRNA產(chǎn)物制備完成后，進(jìn)行LNP配制和包封，組裝疫苗抗原。這是通過(guò)使用微流控或基于噴射的快速混合技術(shù)，將在水性緩沖液中的 mRNA 和在乙醇中的脂質(zhì)混合來(lái)實(shí)現(xiàn)的。然后使用 TFF 和除菌過(guò)濾純化載有 mRNA 的 LNP，用于第3階段的最終灌裝。在此階段，將除菌過(guò)濾和稀釋的 mRNA 疫苗添加到適當(dāng)?shù)男∑恐?，加蓋并密封，以進(jìn)行最終藥物產(chǎn)品包裝。
mRNA 疫苗質(zhì)量源于設(shè)計(jì) (QBD) 框架
要為 mRNA 疫苗設(shè)計(jì)有效的生產(chǎn)工藝，重要的是定義關(guān)鍵質(zhì)量屬性 (CQA) 并了解生產(chǎn)高質(zhì)量抗原所需的檢測(cè)類型。這種方法可以提供一個(gè)路線圖，根據(jù)有關(guān)當(dāng)前生產(chǎn)疫苗的技術(shù)和監(jiān)管要求的先驗(yàn)知識(shí)來(lái)優(yōu)化生產(chǎn)實(shí)踐，以調(diào)節(jié) mRNA 抗原的質(zhì)量，確保產(chǎn)品的效率、效力和安全性以及預(yù)期的免疫效果。
從 mRNA 疫苗活性物質(zhì)到最終藥物產(chǎn)品，需要考慮各種 COA。例如，與 dsRNA 和 mRNA 結(jié)構(gòu)元素（包括 5' 帽和 3' poly-(A) 尾）相關(guān)的質(zhì)量屬性對(duì)于檢測(cè)和調(diào)節(jié)很重要，因?yàn)樗鼈儠?huì)影響細(xì)胞免疫反應(yīng)、翻譯效率和轉(zhuǎn)錄本穩(wěn)定性。同樣，對(duì)于 LNP 配制，了解顆粒大小、電荷和脂質(zhì)含量對(duì)于優(yōu)化藥物產(chǎn)品功效和細(xì)胞免疫反應(yīng)至關(guān)重要。因此，生產(chǎn)框架的設(shè)計(jì)需要整合質(zhì)量屬性和預(yù)期質(zhì)量結(jié)果，以確定在整個(gè)生產(chǎn)過(guò)程中監(jiān)控所需的 CQA。
mRNA 疫苗的生產(chǎn)工藝設(shè)計(jì)需要全面了解質(zhì)量屬性和關(guān)鍵工藝參數(shù)之間的關(guān)系，以確保最終藥品的質(zhì)量。首先要了解 mRNA 疫苗設(shè)計(jì)、可能影響疫苗質(zhì)量的上游和下游工藝。例如，加帽機(jī)制等上游工藝可能需要額外的純化步驟，這可能會(huì)影響抗原產(chǎn)量。監(jiān)測(cè) IVT 反應(yīng)時(shí)間和溫度有助于優(yōu)化 mRNA 產(chǎn)量，同時(shí)保持轉(zhuǎn)錄本的質(zhì)量。檢測(cè)這些參數(shù)對(duì)于確保 mRNA 疫苗抗原質(zhì)量，以避免產(chǎn)品雜質(zhì)（包括 dsRNA 顆粒污染物）非常重要。
下游工藝對(duì)于防止 mRNA 變性和沉淀很重要。例如，需要優(yōu)化與 TFF 結(jié)合的商業(yè)規(guī)模層析方法的選擇，以確定 RNA 截留和純化的最佳條件，同時(shí)保持 mRNA 質(zhì)量。此外，LNP 形成技術(shù)（包括混合率）會(huì)影響 mRNA 封裝和 LNP 顆粒完整性。目前，由于純化技術(shù)和表征工具之間缺乏明確的調(diào)節(jié)或優(yōu)化方法來(lái)監(jiān)測(cè)抗原產(chǎn)量，因此 mRNA 生產(chǎn)仍然存在許多未知的關(guān)鍵工藝參數(shù)。因此，有必要開發(fā)過(guò)程分析技術(shù) (PAT) 解決方案，以更好地了解過(guò)程參數(shù)，確保最終產(chǎn)品的質(zhì)量和純度。
用于 mRNA 生產(chǎn)的 PAT 和數(shù)字設(shè)計(jì)框架
為了連接關(guān)鍵質(zhì)量屬性和過(guò)程控制，可以使用 PAT 開發(fā)分析工具。 PAT 使用數(shù)據(jù)模型創(chuàng)建工具，為工藝優(yōu)化提供有關(guān)質(zhì)量屬性的更多信息，并提供實(shí)時(shí)監(jiān)控生物過(guò)程的解決方案，從而實(shí)現(xiàn)預(yù)測(cè)控制和過(guò)程自動(dòng)化。目前，有許多離線技術(shù)被用于表征基于 mRNA 的疫苗的工藝參數(shù)，包括有關(guān) mRNA 產(chǎn)量、回收率、總含量和結(jié)構(gòu)完整性的信息。然而，有關(guān) mRNA 序列、5' 帽、Poly(A) 尾長(zhǎng)度和 RNA 純度的質(zhì)量屬性仍需要額外檢測(cè)。此外，有關(guān)藥品純度的信息，包括來(lái)自大腸桿菌 DNA 模板生產(chǎn)的 dsRNA 污染物、殘留 DNA、酶和蛋白質(zhì)，對(duì)于確保用于封裝的適當(dāng) mRNA 抗原溶液也很重要。最后，mRNA-LNP 顆粒的特征對(duì)于表征很重要，包括 RNA 封裝、LNP 大小、穩(wěn)定性、電荷、形態(tài)、脂質(zhì)含量和雜質(zhì)，以確保疫苗將被有效和正確地包裝，以實(shí)現(xiàn)適當(dāng)?shù)募?xì)胞攝取。因此，質(zhì)量源于設(shè)計(jì) (QBD) 和 PAT 框架的目的和目標(biāo)是設(shè)計(jì)能夠使用可適用于數(shù)字化建模和實(shí)時(shí)反饋的分析工具測(cè)量所有重要工藝參數(shù)和質(zhì)量屬性的過(guò)程。
已經(jīng)開發(fā)了各種 PAT 工具來(lái)在 mRNA 疫苗生產(chǎn)過(guò)程中實(shí)時(shí)測(cè)量 CQA。例如，可以集成 UV-VIS 光譜法或自動(dòng)通量圓二色性 (CD) 來(lái)監(jiān)測(cè) RNA 完整性和雜質(zhì)。紫外光譜可以應(yīng)用到可用于測(cè)量 RNA 濃度的在線技術(shù)中。另一方面，CD 可用于測(cè)量 RNA 二級(jí)結(jié)構(gòu)。在線動(dòng)態(tài)光散射 (DLS) 可用于在下游純化過(guò)程步驟中測(cè)量 LNP 粒徑分布。包括核磁共振 (NMR) 在內(nèi)的其它分析技術(shù)可用于實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)，以識(shí)別脂質(zhì)并量化脂質(zhì)降解和其它特征，包括納米顆粒結(jié)構(gòu)完整性。這些示例共同強(qiáng)調(diào)了開發(fā) PAT 工具的必要性，這些工具可用于實(shí)時(shí)過(guò)程中監(jiān)控 mRNA 關(guān)鍵質(zhì)量屬性，以更好地理解和控制 mRNA 生產(chǎn)過(guò)程。
結(jié)論
對(duì) mRNA 疫苗的需求不斷增加，需要標(biāo)準(zhǔn)化的方法和監(jiān)管框架。它創(chuàng)造了對(duì)方法創(chuàng)新的需求，以更好地理解和測(cè)量 mRNA 疫苗產(chǎn)量、質(zhì)量和安全概況所需的質(zhì)量屬性?？梢允褂妙愃粕a(chǎn)工藝調(diào)整 mRNA 抗原的多功能性，為開發(fā)可應(yīng)用于未來(lái) mRNA 疫苗抗原平臺(tái)數(shù)字生產(chǎn)的 QBD 框架和模型提供了極好的機(jī)會(huì)。本文中概述的分析工具的開發(fā)將有助于提高對(duì)上游和下游 mRNA 生產(chǎn)過(guò)程的了解。這提供了一個(gè)框架來(lái)幫助轉(zhuǎn)移工藝知識(shí)，這些知識(shí)可以針對(duì)新的疫苗抗原平臺(tái)進(jìn)行調(diào)整和擴(kuò)展。此外，PAT 工具的開發(fā)推進(jìn)了工藝的數(shù)字化，并允許過(guò)程反饋控制，以優(yōu)化 mRNA 疫苗生產(chǎn)流程。
原文：G.Gerzon, Y.Sheng, M.Kirkitadze, Landscape of mRNA vaccine design and manufacturing technologies. Biopharma-Asia, 2023.
